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使用ATCC基因编辑细胞,开启新药筛选之旅
背景介绍
ALK基因调控细胞生长,能够帮助神经细胞增殖,在大脑的发育过程中起到重要作用。当ALK 基因与其他基因比如EML4发生融合,由此产生的EML4-ALK融合基因成为非小细胞肺癌(NSCLC)的主要致癌因子。
EML4-ALK融合基因于2007年在非小细胞肺癌(NSCLC)中首次报道。临床研究发现,EML4-ALK融合出现在大约3-5%的非小细胞肺癌中,而EML4-ALK融合已被确定为重要的药物靶标和诊断生物标志物。
近年来,CRISPR/Cas9基因编辑技术正在给整个科研界带来革命性变化。利用这个技术,乐动(中国)可以轻松对靶基因进行定点突变、敲除,甚至基因插入。
ATCC利用CRISPR / Cas9技术成功构建了EML4-ALK融合基因A549细胞。首先通过Cas9对EML4和ALK基因中的适当位点进行精确切割,通过细胞自身的同源DNA修复系统创造了包含EML4-ALK融合基因A549细胞,为癌症筛查诊断和新药筛选提供了强有力的细胞模型。
严格筛选
经过基因编辑后的细胞克隆经过严格的筛选
基因及转录鉴定包括:
Sanger 法测序
NGS
PCR 和 RT-PCR
蛋白表达和功能鉴定包括:
Western blot
药物反应
其他功能鉴定
细胞形态分析
耐药性分析
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中原生物是ATCC公司授权中国独家代理
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