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如何做细胞亚结构染色?

蛋白在细胞中的定位与其功能密切相关,因此确定目标蛋白的定位很重要。高分辨率成像使得研究人员在研究细胞环境内蛋白时,可以定位并追踪蛋白在细胞内的运动轨迹。为了得到准确的实验结果,确定目标蛋白是否定位于乐动(中国)预期的细胞器中十分重要。

1. 追踪您的目标蛋白

有两种不同的方法可用于确认蛋白在细胞中的定位:细胞器特异性的抗体和细胞器染料。细胞器染料(Abcam有Cytopainter系列染料)作为复染色可以帮助确定特异的蛋白或者您的靶标分子在细胞内的定位,而使用细胞器特异相关的蛋白抗体来进行成像,则有助于更好地理解靶标分子在细胞中的功能。

两者的特点和优势对比如下:

细胞器标志物抗体

特性 优势
超过60个不同细胞器和结构的靶标 方便地找到适用于实验的商业化抗体
现有最明亮的染色 Alexa Fluor®染料带来更高灵敏度
多个宿主物种和克隆 RabMAb®帮助您轻松研究多个目标蛋白

Cytopainter 细胞器染料

特性 优势
适用于活细胞及固定后的细胞 适用于您现有的实验方案
适用于增殖与非增殖细胞 可用于大部分细胞或组织样品
具有很强的光稳定性 光漂白最小,且可以实现长时间曝光

 

 

2. Cytopainter的最佳用途

  • 研究活细胞---现有的商业化抗体只能用于经固定的细胞,因此不能用于活细胞的追踪研究。大多数细胞器染料可以对活细胞与固定后细胞的细胞器进行准确染色。这一特性意味着它们可以与抗体一起进行共染色实验。

  • 研究多个蛋白---使用抗体研究多个靶标,其数量受到荧光偶联抗体的限制。细胞器染料则绕过了这一限制,因为它们是化合物,当实验需要多个靶标时,可以根据抗体来选择适用的细胞器染料。

  • 细胞形态学/靶标分布研究---在疾病模型和突变细胞中,目标蛋白的细胞定位可能发生改变,或者细胞器的形态可能被改变,只要亚细胞结构完整,细胞器染料就能对其染色。

3. 亚细胞荧光染色试剂盒

目前Abcam可以提供很多用于细胞亚结构的Cytopainter荧光染色试剂盒,常用的一些细胞器染色试剂盒汇总如下:

希望信息以上这些对于您的研究有帮助。

 

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