Bio-Techne 的 ELISA 试剂盒家族阵容强大，简直是神仙打架：既有享誉业界的金标准 Quantikine® 系列，又有性价比之王 Valukine® 系列，还有为 ELISA 高手量身打造的 DuoSet® 系列。

一、DIY 你的专属 ELISA 试剂盒

说起 DuoSet® 系列，其属于开发型 ELISA 试剂盒，适合动手能力强、经验丰富的 ELISA「资深玩家」，特别适用于在各种不同平台上进行免疫学实验开发设计，为研究者提供极为经济、灵活、快捷的方案。DuoSet® ELISA 试剂盒的组分包括：捕获抗体、生物素化检测抗体、校正的蛋白标准品、链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶（Streptavidin-HRP）。

与包含 ELISA 实验所有必需试剂的即用型 Quantikine® ELISA 试剂盒不同，DuoSet® ELISA 试剂盒验证了细胞培养上清的样本，如需检测含有复杂基质的样本（如血清和血浆等），则需要进一步优化。

二、如何选择 DuoSet 的黄金搭档

那么要顺利开展完整的 ELISA 实验，DuoSet® ELISA 试剂盒需要搭配哪些附属试剂？乐动（中国）的产品说明书提供了详细信息。

在说明书的「Other Materials & Solutions Required」部分，会提示需要搭配哪些试剂，产品页面也会给出建议搭配的附属试剂（请参考下图）。大部分 DuoSet® ELISA 试剂盒可以直接购买成套的辅助试剂盒，例如 DY007、DY008、DY009 等。

如果你有较长时间的 ELISA 开发经验，可自行配制一套合适的附属试剂。如果你是初次接触 DuoSet® ELISA 试剂盒，附属试剂的配制又稍显繁琐，这时乐动（中国）还是推荐使用 DY007、DY008 或 DY009 作为起步，因为这些附属试剂盒均已经过验证，适用于 ELISA 实验。

此外附属试剂盒的组分也可单独出售。例如：DY008 由以下试剂组成，每种试剂均可单独购买：

• ELISA Plate-Coating Buffer，DY006；
• Stop Solution，DY994；
• Substrate Reagent Pack (8 vials Color A, 8 vials Color B)，DY999；
• Wash Buffer Concentrate，WA126；
• Clear Polystyrene Microplates，25 pack，DY990；
• ELISA Plate Sealer，100 Pack，DY992；
• Reagent Diluent Concentrate 2 (10X, 5x21 mL)，DY995。
   

为什么有必要提及附属试剂？乐动（中国）举个来自用户的例子，体现附属试剂的重要性：

下表中显示，用户使用 cat# DY450：Mouse CCL3/MIP-1 alpha DuoSet ELISA 和自行组配的附属试剂，得到的标准品 OD 值（450 nm 的测定值减去 570 nm 的测定值）。可以看到，全部标准品 OD 值（包括未加标准品 0 值孔）均出现高的显色，无梯度。

经过问题排查，乐动（中国）推测可能是附属试剂牛血清白蛋白（BSA）造成的影响。实际上，几乎所有的 BSA 制剂中都会发现不同程度的杂质，例如蛋白酶、结合蛋白、可溶性受体或其他干扰物质，会抑制或干扰某些分析物的检测。

乐动（中国）推荐使用 fraction V（第五组分），无蛋白酶的 BSA，例如 Reagent Diluent Concentrate 1 或 2（货号 DY995，DY997）。后续用户使用 DY008 附属试剂盒替代之前的附属试剂，重新实验，结果恢复正常。

不仅是 BSA，任何一种附属试剂出现问题，都可能对 ELISA 结果造成极大的影响。所以，如果您希望尽快的开展 DuoSet®  ELISA 实验，推荐以 DY007、DY008、DY009 为起点开始尝试，一步步进阶大神。

以上文字和图片来源于Bio-techne